2022年4月12日,科技中心基础研究部临床医学研究所举办了题目为“类器官芯片串联培养·全自动数字WB”的学术讲座。讲座由王在和张韫老师组织举办,线上进行。

类器官芯片串联培养

讲座首先邀请到德国Tissuse公司技术专家周亮老师进行类器官芯片串联培养技术最新进展的讲解。如今,随着药物研发的不断推进,我们用于药物筛选的成本也在不断增加,但目前药物筛选所用的小动物模型不能完全模拟人类的生理机能,因此获得更可靠和经济的药品筛选工具就变得更加关键。类器官模型是一种3D细胞培养系统,它与人体内的组织器官高度相似,能模拟许多存在于人体组织中的微环境条件,表现出细胞间和细胞与基质之间的相互作用。到目前为止,类器官已用于各种组织,如心脏、脑、肝脏、肺、睾丸、肠道等的研究中。由于类器官具有与人体组织器官几乎相同的方式对药物和毒素做出反应的能力,因此非常适合于药物开发和筛选的应用。

另外,类器官芯片串联技术可以将多个类器官整合到一个通用的循环介质环境中,从而支持更复杂、更符合生理学意义的药物研究。在类器官芯片串联实验中,一种或多种类器官可以影响系统中其他类器官对所施用的化合物做出反应,从而更好地反应器官间的生理相关性。另外,将药物靶器官和肝脏、肾脏等类器官芯片串联,可在测试药物效果的同时,检测药物在人体相关剂量下对肝脏、肾脏的毒副作用,以便在不安全药物到达临床应用前对其进行准确监测,保障临床患者用药的安全性。

全自动数字WB

讲座邀请ProteinSimple产品经理苏倩博士进行全自动数字WB技术的介绍。全自动数字式WB技术,突破了传统WesternBlot实验步骤繁琐、上样量大、无法准确定量、重现性差等技术瓶颈,来自Biotechne公司的Jess系统可自动完成蛋白上样、毛细管电泳分离、蛋白固定(无需转膜)、抗体孵育、化学发光或荧光信号检测等步骤,整个实验流程耗时仅3小时,实验结果重复性高,对整个WB实验可实现“操作自动化、流程标准化、样本微量化,结果可量化”的优势。

Jess单次可运行13个或25个样本,使用400nl毛细管,只需1μg左右总蛋白,即可进行目标蛋白表达水平准确定量检测,适合分选细胞、激光显微切割样本、临床穿刺样本等珍贵样本。对于小至2kD的多肽、细胞因子、神经递质、激素,大到440kD的蛋白,Jess均有标准程序可以覆盖,一键自动完成全程检测。对于蛋白翻译后修饰的检测,Jess可应用双色荧光检测,区分大小相近的磷酸化蛋白和总蛋白。此外,Jess可使用蛋白质归一化试剂,对蛋白样品进行归一化定量后,再进行抗体杂交步骤,提高蛋白定量的准确性。